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人結(jié)腸癌細(xì)胞株為何多取上皮細(xì)胞樣?

原載自:tajnning.com[技術(shù)資料頻道]  2025-11-17  瀏覽次數(shù):7

  打開ATCC或中科院細(xì)胞庫目錄,HT-29、HCT116、LoVo、SW480……等人結(jié)腸癌細(xì)胞株都標(biāo)注“epithelial-like”。明明腫瘤微環(huán)境里還有成纖維、內(nèi)皮、免疫細(xì)胞,為何建株時(shí)偏偏只剩“上皮臉”?
  一、起點(diǎn)決定方向
  結(jié)腸壁分四層,癌變90%始于最內(nèi)層“粘膜上皮”。腺上皮細(xì)胞自帶端粒酶再激活、Wnt/β-catenin突變等“第一擊”,最易永生化;而平滑肌、間質(zhì)細(xì)胞缺乏這些驅(qū)動突變,自然成不了“氣候”。
  二、酶消化“偏心”
  建株常用膠原酶Ⅺ+Dispase雞尾酒,作用靶點(diǎn)是間質(zhì)膠原,目的在于“松”開上皮管腔。結(jié)果上皮細(xì)胞被溫和剝離,成纖維細(xì)胞雖也被釋放,卻因其對胰酶更敏感、貼壁快而被后續(xù)差速貼壁2 h淘汰;上皮團(tuán)塊靠E-cadherin緊緊抱成球,反而保留下來。
  三、培養(yǎng)基“拉偏架”
  經(jīng)典DMEM/F12+10%FBS里,表皮生長因子EGF、胰島素是標(biāo)配,它們通過EGFR→MAPK軸驅(qū)動上皮增殖;而對成纖維細(xì)胞,高濃度EGF反而促分化、易衰老。兩周后,上皮長成“鋪路石”樣集落,間質(zhì)細(xì)胞逐漸凋亡,視野里就只剩上皮樣細(xì)胞。
  四、形態(tài)可塑
  腫瘤組織中原有部分細(xì)胞已發(fā)生EMT(上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化),呈梭形。但體外缺少TGF-β、IL-6等間質(zhì)信號,E-cadherin重新上調(diào),細(xì)胞“回滾”成上皮狀態(tài),表現(xiàn)為鋪路石或島狀排列,于是被記錄為“epithelial-like”。
  五、實(shí)用考量
  上皮細(xì)胞角蛋白(CK20、CK8/18)陽性、E-cadherin膜表達(dá),標(biāo)志清晰,可做免疫熒光、類器官3D培養(yǎng);若混雜大量vimentin陽性的間質(zhì)細(xì)胞,不僅影響轉(zhuǎn)染效率,還會干擾藥物靶點(diǎn)判定??蒲行枨蠓聪蛲苿?ldquo;選上皮、棄間質(zhì)”。
  人結(jié)腸癌細(xì)胞株之所以“多取上皮細(xì)胞樣”,并非因?yàn)橄聦哟渭?xì)胞不想永生,而是解剖起點(diǎn)、酶消化偏愛、培養(yǎng)條件篩選與科研取向共同寫下的“劇本”。了解這層偏向,才能提醒我們:研究腫瘤微環(huán)境時(shí),別忘了把“被丟掉”的間質(zhì)細(xì)胞重新請回舞臺。

 

 

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