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原載自：tajnning.com[技術(shù)資料頻道] 2017-09-22 瀏覽次數(shù)：2145

　　人結(jié)腸癌細胞株是一種成團、貼壁生長的細胞,如果狀態(tài)好的情況下,生長非常快，細胞形態(tài)是不太規(guī)則的三角形.在低濃度時，此細胞長梭型（不好描述），高濃度時長成一張地毯，后者才是狀態(tài)的。

　　人結(jié)腸癌細胞株培養(yǎng)操作步驟：

　　1．人結(jié)腸癌細胞株細胞用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

　　2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

　　3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

　　4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

　　5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

　　人結(jié)腸癌細胞株注意事項：

　　1、觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。

　　2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

　　3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內(nèi)。

　　4、收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們。